
在行业内,人们普遍认为冻干试剂性能不佳,一个重要原因在于使用者。在使用过程中,常常会出现气泡和溶解问题。冻干试剂溶解后,局部浓度极高,需要时间进行扩散。若扩散不均匀,反应效率就会降低,CT值延后。此外,试剂浓度局部过高还会影响荧光信号的激发与采集,导致背景荧光强度过高。随着循环升降温过程,溶液缓慢扩散荧光信号的逐步减弱。而后随着DNA扩增过程荧光信号又会逐步增强,最终形成抛物线状的反应曲线,这容易造成很多仪器误判和错读。
因此,在冻干试剂的溶解和使用过程中,必须采用专门方法。传统方法中,将八连管放在涡旋仪上涡旋,效果并不理想;采用吹打方式则可能造成污染,且操作步骤繁琐、对人员要求高。在8连管使用移液枪吹打还可能被枪头带走液体,影响反应体系。